藍(lán)光/綠光LED凝膠成像儀

技術(shù)

        核酸的檢測(cè)目前仍然主要是使用溴化乙錠這類(lèi)核酸染色劑及紫外光照射。然而，紫外線(xiàn)對(duì)核酸的降解已有很多文獻(xiàn)報(bào)道，因此可以認(rèn)為它本身就是一種核酸破壞劑。此外，紫外線(xiàn)對(duì)使用者來(lái)說(shuō)也具有危險(xiǎn)性。因此總的來(lái)說(shuō)，目前的這類(lèi)核酸檢測(cè)技術(shù)會(huì)由于DNA分子的破壞，而導(dǎo)致如測(cè)序、克隆等多種下游應(yīng)用的效率大大降低。無(wú)害化的可見(jiàn)光已經(jīng)被用于檢測(cè)核酸，其主要局限性是只能激發(fā)綠色染料。以其開(kāi)發(fā)的全新安全核酸染料MIDORIGreen而聞名的NIPPON Genetics EUROPE公司，針對(duì)目前的核酸檢測(cè)技術(shù)開(kāi)發(fā)了一種全新的核酸染料檢測(cè)方法，它能夠激發(fā)所有商用核酸染料。

紫外燈的危害性

        DNA能夠吸收紫外光譜中的光。其結(jié)果是形成嘧啶二聚體；單鏈DNA和雙鏈DNA斷裂，DNA與DNA發(fā)生鏈間交聯(lián)和DNA與蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián)。雖然生物體能夠修復(fù)這些DNA損傷并承受上述后果，但瓊脂糖凝膠中的DNA缺乏這些修復(fù)機(jī)制。此外，與整個(gè)生物體相比，凝膠中的DNA量要少得多。下面是對(duì)短期紫外線(xiàn)照射引起的DNA降解的研究結(jié)果：電泳后，凝膠暴露在紫外線(xiàn)下長(zhǎng)達(dá)60秒。PCR產(chǎn)物隨后被分離并克隆到一個(gè)對(duì)照載體中，之前用NdeI和HindIII進(jìn)行雙酶切，然后被克隆并轉(zhuǎn)染到大腸桿菌DH5α(BL21)細(xì)胞中。結(jié)果如下:

        暴露在紫外線(xiàn)下的DNA受損嚴(yán)重，克隆效率明顯降低。紫外照射60s后，DNA含量比空對(duì)照組要少得多。因此，我們確認(rèn)了紫外線(xiàn)照射引起的DNA降解并且*破壞DNA。

一代技術(shù)---藍(lán)色LED

        2009年，科研界引入了藍(lán)光發(fā)光二極管（LED）透射器。LED是能將電轉(zhuǎn)化為光的半導(dǎo)體。其優(yōu)點(diǎn)是波長(zhǎng)，效率*，平均壽命高達(dá)50000小時(shí)。它們發(fā)射出比紫外線(xiàn)波長(zhǎng)更長(zhǎng)的470nm波長(zhǎng)的光。

重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，并將DNA暴露在藍(lán)色LED燈下相同時(shí)間：

正如理論所預(yù)期的那樣，暴露后每板CFU的數(shù)量沒(méi)有任何顯著變化。因此，防止DNA損傷大大提高了克隆效率。

藍(lán)色LED的問(wèn)題

        雖然使用了更為安全的光源，但使用藍(lán)色LED也有一個(gè)主要缺點(diǎn)。溴化乙錠，常見(jiàn)的DNA染色法，在藍(lán)光激發(fā)下其結(jié)果往往比紫外要差很多。溴化乙錠與DNA結(jié)合的激發(fā)峰在480～525nm之間。如結(jié)果所示，溴化乙錠與DNA結(jié)合的信號(hào)非常微弱，幾乎無(wú)法使用。綠色DNA染料，如MIDORIGreen染料，通過(guò)藍(lán)色LED可以提供更好的信號(hào)。

技術(shù)革新---藍(lán)光/綠光LED凝膠成像儀

        NIPPON Genetics EUROPE公司為解決這個(gè)問(wèn)題提供了檢測(cè)核酸染料的全新策略：通過(guò)創(chuàng)新性地引入波長(zhǎng)組合而不使用單一波長(zhǎng)，從而產(chǎn)生470nm至520nm的藍(lán)光/綠光光譜，這樣能夠激發(fā)470nm單一波長(zhǎng)不能激發(fā)的染料，例如溴化乙錠等。并且可以通過(guò)染料的累積能量吸收來(lái)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。

        藍(lán)/綠LED透射臺(tái)（FG-08）產(chǎn)品正是基于這一原理發(fā)展而來(lái)：所有DNA染料的信號(hào)強(qiáng)度終都有可能達(dá)到使用強(qiáng)紫外線(xiàn)透照儀的信號(hào)強(qiáng)度，但使用的光源卻是更安全的。溴化乙錠和更安全的替代品通過(guò)這種*的技術(shù)得到了一個(gè)更好的信號(hào)，并在下游應(yīng)用中取得了更好的效果，并創(chuàng)造了一個(gè)更安全的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。NIPPON Genetics EUROPE公司使用這一革命性技術(shù)而研發(fā)了獨(dú)立成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)。

“我只使用藍(lán)/綠LED成像系統(tǒng)和MIDORIGreen Direct染料，它從來(lái)就沒(méi)有讓我失望過(guò)！”

-----------Jean Emly博士, Geneflow Ltd.公司創(chuàng)始人 , 英國(guó)

★  混合LED波長(zhǎng)可產(chǎn)生光譜，激發(fā)多種染料。

★  無(wú)DNA/RNA降解或者損傷，保證下游實(shí)驗(yàn)效率

★  激發(fā)溴化乙錠產(chǎn)生更強(qiáng)的信號(hào)，超高檢測(cè)高靈敏度

★  還可以激發(fā)各種熒光蛋白，如GFP、RFP等

成像系統(tǒng)產(chǎn)品-1　----藍(lán)/綠 LED GelPicBox

        藍(lán)/綠LED GelPicBox 將緊湊的占機(jī)身與藍(lán)/綠LED技術(shù)的優(yōu)勢(shì)結(jié)合在一起。這可能是世界上小的成像系統(tǒng)。FastGene®藍(lán)/綠LED GelPicBox配有藍(lán)/綠和白色LED，用于記錄核酸、蛋白質(zhì)凝膠和膜。

主要特點(diǎn)

  •  小的成像系統(tǒng)

  •  2.7” LCD顯示屏

  •  16 cm x 11.5 cm 觀察區(qū)域

  •  藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)

  •  USB 2.0 接口FastGene®藍(lán)/綠LED GelPicBox 將緊湊的占機(jī)身與藍(lán)/綠LED技術(shù)的優(yōu)勢(shì)結(jié)合在一起。世界上小的成像系統(tǒng)。

應(yīng)用

  •  紅色和綠色 DNA/RNA染料的檢測(cè)

  •  GFP, eGFP, YFP等熒光蛋白的檢測(cè)

  •  蛋白質(zhì)凝膠記錄

  •  培養(yǎng)皿和膜記錄

  •  瓊脂糖凝膠中DNA的切取

圖像格式

  •  Jpeg

  •  TIFF

  •  BMP

照明

---藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)有的激發(fā)技術(shù)

  •  能夠檢測(cè)紅色和綠色 DNA染料

  •  成像面積 16 cm x 11 cm

  •  超均勻透射

  •  每側(cè)12個(gè)LED陣列

---白色LED

  •  蛋白檢測(cè)

  •  白色LED置于蓋上

---白色LED暗室燈

  •  膜和培養(yǎng)培養(yǎng)皿記錄

  •  兩個(gè)白色LED陣列照亮成像箱

選配

---CMOS傳感器

  •  固定焦距

  •  9 M像素

  •  圖像可以以TIFF、JPEG和BMP格式記錄

  •  外接U盤(pán)

成像系統(tǒng)產(chǎn)品-2　----FAS-Digi

        FAS Digi是采用藍(lán)/綠LED成像技術(shù)的成像系統(tǒng)，并采用了模塊化系統(tǒng)設(shè)計(jì)。它由FastGene® 藍(lán)/綠 LED 透射臺(tái)(FG-08) 和相機(jī)組成，擁有我們所有成像系統(tǒng)中分辨率和令人難以置信的16M像素。攝像頭支持Wi-Fi，可以使用智能設(shè)備進(jìn)行控制。

主要特點(diǎn)

  •  超高分辨率 - 16 MPixel LiveMOS 傳感器

  •  3” 可翻轉(zhuǎn)觸摸屏

  •  20 cm x 16 cm 藍(lán)色/綠色 LED 透射臺(tái)

  •  兼容白色LED透射臺(tái)

  •  可由智能手機(jī)和平板電腦控制

應(yīng)用

  •  紅色和綠色 DNA/RNA染料的檢測(cè)

  •  GFP, eGFP, YFP等熒光蛋白的檢測(cè)

  •  蛋白質(zhì)凝膠記錄

  •  培養(yǎng)皿和膜記錄

  •  瓊脂糖凝膠中DNA的切取

圖像格式

  •  Jpeg

  •  RAW

照明

---藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)的激發(fā)技術(shù)

  •  能夠檢測(cè)紅色和綠色的DNA染料

  •  成像面積20 cm x 16 cm

  •  超均勻透射

  •  每側(cè)均有6個(gè)大型LED陣列

選配

---LiveMOS傳感器

  •  24 mm - 64 mm 焦距(256 mm 數(shù)碼變焦)

  •  16 MPixel

  •  觸摸屏對(duì)焦

  •  圖像可以用JPEG和RAW格式記錄

成像系統(tǒng)產(chǎn)品-3----FAS-V 

        FAS-V是我們的成像系統(tǒng)。它是一個(gè)獨(dú)立的成像系統(tǒng)，內(nèi)置一臺(tái)電腦和一個(gè)10.4英寸的觸摸屏。它包含了我們迄今為止大的成像區(qū)域，用于DNA和蛋白質(zhì)成像。它可選超靈敏的CCD傳感器與齊焦透鏡，這種相結(jié)合的方式通常只有在顯微鏡中才能看到。我們?cè)谶@個(gè)易于使用的系統(tǒng)中將*的激發(fā)技術(shù)與部件相結(jié)合以提供檢測(cè)結(jié)果。

主要特點(diǎn)

  •  超靈敏2MPixel CCD相機(jī) (0.13 Lux)

  •  10.4” 觸摸屏

  •  26 cm x 21 cm 藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)

  •  26 cm x 21 cm 白色LED 透射臺(tái)

應(yīng)用

  •  DNA/RNA 染料的檢測(cè)和記錄

  •  GFP, eGFP, YFP等熒光蛋白的檢測(cè)

  •  蛋白質(zhì)凝膠記錄

  •  培養(yǎng)皿和膜記錄

  •  第三方圖像編輯

圖像格式

  •  Jpeg

  •  TIFF

  •  BMP

  •  PNG

照明

---藍(lán)色/綠色 LED透射臺(tái)有的激發(fā)技術(shù)

  •  能檢測(cè)紅色和綠色DNA染料

  •  超大的26 cm x 21 cm 成像區(qū)域

  •  超均勻透射

  •  每側(cè)12個(gè)大型LED陣列

---白色LED透射臺(tái)

  •  蛋白檢測(cè)

  •  超大LED白光板 (26 cm x 21 cm)

  •  觸摸屏直接控制

---白色LED暗室燈

  •  膜及培養(yǎng)皿記錄

  •  兩個(gè)白色LED陣列照亮成像箱

選配

---CCD傳感器

  •  CCD傳感器尺寸1/1.8“

  •  像素尺寸4.4 μm

  •  極弱信號(hào)（0.13 Lux*）檢測(cè)

  •  圖像可以以 TIFF, JPEG, BMP 和PNG格式保存

  •  16 GB內(nèi)部固態(tài)硬盤(pán)存儲(chǔ)或外部USB存儲(chǔ)

  •  曝光時(shí)間0.001秒至30秒

  •  日本制造 *正常一天的清晰度在20000到100000Lux之間